浸润性乳腺癌组织表达α－5、β－1整合蛋白的临床病理意义

癌症 1999年第4期第18卷 论著摘要

作者：皋岚湘　丁华野　邓永江　刘光

单位：北京军区总医院病理科(北京，100700)

关键词：乳腺肿瘤；整合蛋白；免疫组织化学

　　中图分类号：R737.9　　文献标识码：A

　　文献编号：1000－467X(1999)04－0465－01

　　整合蛋白(integrin)是一种特殊的细胞表面膜蛋白，为重要的细胞粘附因子^[1～2]。它在结构上具有多态性，由α和β二个亚单位构成异源性二聚体复合物，其不同状态的复合物可与不同的粘附蛋白结合。我们最近研究发现，纤维粘连蛋白(fibronectinFN)在乳腺癌细胞外基质(ECM)中占较大比例，并且表达量多与患者预后好有明显关系^[3]。国外研究证实α－5、β－1整合蛋白是大多数细胞表面较大的FN受体，它与FN之间的相互关系可对恶性肿瘤发生多方面的作用^{[1～2][4～5]}。但它在乳腺癌实体瘤中的表达状况及意义还不十分明确。为了进一步证明其作用和意义，我们对α－5、β－1整合蛋白在乳腺癌的表达进行了初步研究和观察。

　　1　材料和方法

　　1.1　材料

　　收集我院乳腺癌手术标本存档蜡块94例，均为10％甲醛固定及常规包埋。按着WHO分类标准进行病理分型。参照Elston和Ellis改良的Scarff－Bloom－Richardson分级法，对浸润性导管癌进行定量分级。

　　1.2　免疫组化染色

　　切片厚4μm。单克隆鼠抗人CD29(Intergrinα－5β－1链)抗体(克隆号35493，美国Pharmingen公司产品，购置于深圳晶美生物工程有限公司)，稀释度1∶100。采用S－P法染色，染色步骤按试剂盒(DAKO公司产品)说明书。滴加抗体前将切片进行微波抗原修复。用正常淋巴结切片作阳性对照；不加第一抗为阴性对照。

　　1.3　阳性结果判断

　　由2名医师分别对免疫组化切片进行评估。CD29阳性物质位于肿瘤细胞内，其强度从以下二个方面进行打分定量判断：①阳性着色：可见明确的浅黄色为1分，深黄色2分，棕黄色3分；②阳性细胞数：用高倍视野(HPF)在每张切片上计算1000个以上癌细胞，阳性细胞数10％～25％为1分、26％～50％为2分、51％～100％为3分。0分为阴性(－)，2为弱阳性(＋)，3分为轻度阳性(＋＋)，4～5分为中度阳性(＋＋＋)，6分为强度阳性(＋＋＋＋)。

　　1.4　统计学分析

　　所有资料建立在foxpro数据库中，采取卡方检验法，使用SAS软件进行统计学处理。

　　2　结果

　　2.1　α－5、β－1整合蛋白在乳腺癌及癌旁组织的表达情况

　　α－5、β－1整合蛋白可在乳腺正常小叶的肌上皮和腺上皮细胞、血管内皮和平滑肌、神经纤维、纤维母细胞和淋巴细胞中表达。本组乳腺癌表达率为84.0％，其中弱阳性16例(17.0％)，轻度阳性22例(23.4％)，中度阳性27例(28.7％)，强阳性14例(14.9％)。阳性物质主要位于癌细胞膜或胞浆中，呈颗粒和团块状，亦可在核内表达。

　　2.2　α－5、β－1整合蛋白在浸润性乳腺癌中的表达与临床病理参数的关系(见表1)

表1　浸润性乳腺癌α－5、β－1整合蛋白表达与临床病理参数的关系

　　注：IDC为漫润性导管癌，LIC为漫润性小叶癌，MYC为粘液癌MC，为髓样癌，TC为管状癌　　本组除浸润性导管乳腺癌外，因其它类型例数太少，各型之间未做统计学分析。病理分级为Ⅰ和Ⅱ级者中度以上表达率明显高于Ⅲ级(χ²=6.57，P＜0.05)。本组此蛋白的表达与肿瘤大小和淋巴结转移无显著相关性 。

　　2.3　α－5、β－1整合蛋白的表达与浸润性乳腺癌患者预后的关系

　　本组获得2年以上随访材料者45例(最长者为144个月)。其表达情况见表2，2＋以上者生存组(90.4％)比死亡组(58％)明显增高，4＋者两组之间有显著性差异的趋势(χ²=3.18，P=0.0765)。

　　3　讨论

　　整合蛋白是细胞间和细胞与ECM间相互粘附不可缺少的受体，肿瘤要维持肿块的完整性亦需要这种受体的存在。本组结果显示大多数乳腺癌有α－5、β－1整合蛋白的表达(84％)，表明此种蛋白在乳腺癌的形成和发展中具有重要的作用。本组显示表达强度与乳腺癌的分化程度有明显的关系，分化差的表达强度较弱。因而可以引起分化差的乳腺癌：①腺管形成得少，细胞之间粘附性差；②肿瘤细胞增殖性强(核异形性大，核分裂多)，有研究表明整合蛋白的表达与细胞增殖呈相反的关系^[5]。本组表达强度与患者预后也有一定的相关性趋势，表达弱者预后较差。表明此蛋白表达水平低，易发生远处转移而引起死亡。但本组结果也有相矛盾之处，即其表达强度与淋巴结转移无明显关系。肿瘤细胞在进入血管和淋巴管道时，其参与调节细胞粘附和迁移的因子是否存在不同?α－5、β－1整合蛋白是否不能单独评价肿瘤的生物学特性?这一问题有待进一步观察。

表2　α－5、β－1整合蛋白的表达与浸润性乳腺癌患者预后的关系

　　基金项目：解放军医药卫生科研基金资助(编号96M009)

　　参考文献

　　1　Akiyama SK,Olden K,Yamada KM.Fibronectin and integrins in invasion and metastasis [J] .Cancer and Metastasis Rev,1995,14:173～189.

　　2　Ruoslahti E.Cell adhesion and tumor metastasis [J] .Princess Takamatsu Symp,1994,24:99～105.

　　3　皋岚湘，陈乐真，丁华野，等.纤维连接蛋白、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白在浸润性乳腺癌组织中的表达及意义[J].解放军医学杂志，1998，23(3)：181.

　　4　Nista A,Leonetti C,Bernardini G,et al.Functional role of alpha 4 beta 1 and alpha 5 beta1 integrin fibronectin receptors expressed on adriamycinresistant MCF－7 human mammary carcinoma cells [J] .Int J Cancer,1997,79:133～141.

　　6　Varner JA,Emerson DA,Juliano RL.Integrin alpha 5 beta 1 expression negatively regulates cell growth:reversal by attachment to fironectin [J] .Mol Biol Cell,1995,6:725～740.

收稿日期：1998－10－12；修回日期：1998－12－17