细胞周期蛋白D1在肺癌中的表达及价值

中华结核和呼吸感染 1999年第5期第22卷 论著摘要

作者：李本全　李清泉　潘显光

单位：430060 湖北医科大学附属第一医院呼吸内科

　　细胞周期蛋白的过表达与肿瘤的发生、 转移和预后密切相关^［1，2］。我们对细胞周期蛋白D1在肺癌中的表达及其在肺癌的诊断、 治疗及预后的价值进行了研究。

　　材料与方法　71例肺癌组织及20例肺良性病变(慢性炎症、肺大疱、支气管扩张症等）肺组织均取自湖北医科大学附属第一医院病理科,为手术切除标本及纤维支气管镜活检组织, 按WHO标准对肺癌组织进行分类、 分期。

　　采用免疫组织化学SP法检测。鼠抗人细胞周期蛋白D1 单克隆抗体(DCS/6)及加强型SP 试剂盒购自福州迈新生物技术公司; 用已知细胞周期蛋白D1阳性的的膀胱癌作阳性对照, 阴性对照用PBS液代替一抗。细胞核和(或)细胞质呈不均匀棕黄色细颗粒状或棕褐色团块状为阳性。按着色强度及阳性细胞数所占百分比0、＜25%、25%～75%、＞75%进行半定量分级, 分别为(-)、(+)、(++)、(+++)。

　　采用χ²检验和四格表确切概率法进行统计学处理。

　　结果　细胞周期蛋白D1的免疫反应产物在细胞中的分布情况见表 1; 肺癌不同组织学类型细胞周期蛋白D1表达情况见表2;本研究还表明:Ⅲ～Ⅳ期鳞癌、腺癌阳性率明显高于Ⅰ～Ⅱ期,且Ⅲ～Ⅳ期鳞癌、 腺癌细胞周期蛋白D1表达多为强阳性。

表1　细胞周期蛋白D1免疫反应产物在细胞中的分布情况

　　各组间比较P＞0.05

表2　肺癌不同组织学类型细胞周期蛋白D1的表达情况

　　注：与良性病变相比^△P＜0.01(χ²=13.22)，^▲P＜0.01(χ²=11.91)；与小细胞癌相比^△P＜0.01(χ²=10.54)，^▲P=0.0003，其余组间比较P＞0.05

　　 讨论　关于细胞周期蛋白D1在细胞中的定位问题,国内外学者报道不一。本实验结果显示, 在肺癌细胞中，细胞周期蛋白D1可定位于细胞核和(或)细胞浆。因为, 在多种恶性肿瘤细胞中，存在染色体重排和转录后调节现象, 可产生大量的细胞周期蛋白D1, 且多分布于细胞质中；体外研究也表明, 当细胞周期处于G₁期时,细胞周期蛋白D1主要定位于核内， 当处于G₁S 期时，则主要定位于细胞质中，可能由于细胞周期蛋白D1的可溶性发生变化所致。本研究中有1例慢性炎症病变中出现细胞周期蛋白D1的弱阳性, 这可能因为在正常组织的上皮增殖区存在着极低水平的细胞周期蛋白D1（这是细胞生长和增殖所必需的）。炎性因子的刺激可能使细胞周期蛋白D1的表达略有升高；抗原修复也可能造成一定的假阳性。Schauer检测了多种肺肿瘤细胞系中细胞周期蛋白D1的变化情况 ,发现在非小细胞性肺癌(NSCLC)中过表达;而在小细胞性肺癌(SCLC)中则无明显的过表达^［3］,我们研究结果与文献大致吻合。这些均表明NSCLC的发生与细胞周期蛋白D1存在着密切的关系。亦说明细胞周期蛋白D1可以作为NSCLC诊断的一个分子标志物。本研究还提示晚期肺癌细胞周期蛋白D1的表达明显高于早期肺癌。因此,细胞周期蛋白D1是肺癌预后的的重要标志物。Schrump等用一种带有反义细胞周期蛋白D1的载体转染肺癌细胞系,发现它能阻止CCND1的表达，使细胞周期停滞在G1期, 从而抑制细胞生长。这表明细胞周期蛋白D1在肺癌的基因治疗中可能会起到一定的作用^［4］。

　　 参考文献

　　1　Masuda M, Hirakawa N, Nakasshima T, et al. CyclinD1 overexpression in primary hypopharyngeal cacinomas. Cancer, 1996,78:390-395.

　　2　Jares P, Fernadoz L, Campo E, et al. PRAD1/CyclinD1 gene amplication corrlates with messenger RNA overexpress and tumor progression in human laryngeal carcinomas. Cancer Res, 1994，54: 4813-4817.

　　3　Schauer IF, Siriwardana S, Langan TA, et al. CyclinD1 overexpression vs retinnoblastoma inactivation: implications for growth control evasion in non-small cell and small cell lung cancer. Proc Natl Acad Sci USA, 1994,91: 7827-7831.

　　4　Schrump DS, Chen A, Consoli U. Inhibition of lung cancer proliferation by antisense cyclinD1. Cancer gene ther, 1996，3:131-135.

(收稿：1998-05-18　　修回：1998-10-28)