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胰腺癌细胞DNA倍型及临床意义的评价

胰腺癌细胞DNA倍型及临床意义的评价

临床外科杂志 1999年第6期第7卷 论著

作者:贺银成 陈纪伟 潘定宇 王德骏 周亚魁 史海安

单位:430071 武汉,湖北医科大学附二医院普外科

关键词:胰腺肿瘤;DNA/分析;倍性

  【摘要】 目的 了解胰腺癌细胞DNA倍型及临床意义。方法 68例胰腺癌组织标本,行Feulgen染色,应用全自动图像分析仪测定癌细胞DNA含量及倍型。结果 本组2倍体/近2倍体(2C)率及异倍体(AN)率分别为26.5%及73.5%。2C肿瘤比AN有较高的手术切除率,较好的预后(P<0.05),手术时实测2C肿瘤体积小,临床分期早。DNA倍型与病理分级无关(P>0.05),而与临床分期、肿瘤大小相关(P<0.01)。结论 胰腺癌细胞异倍体率高,临床上表现为恶性程度高,手术切除率低,预后差。

Clinical significance of nuclear DNA ploidy in pancreatic carcinoma

HE Yincheng,CHEN Jiwei,PAN Dingyu,et al

  Department of General Surgery,Second Affiliated Hospital,Hubei Medical University,Wuhan 430071

  【Abstract】 Objective To investigate DAN nuclear ploidy pattern of pancreatic carcinoma.Method The nuclear DNA content and ploidy of 68 specimens of pancreatic adenocarcinoma were analysed by an image analyser system.Result The ploidy study demonstrated 26.5% of patients with diploid/near diploid and 73.5% with aneuploid cancer.The patients with diploid tumor had better survival and chance of radical operation,smaller tumor voloume and earlier clinical stage compared with aneuploid tumor(P<0.05).No relationship between DNA ploidy and histologic differentiation was observed(P>0.05).A stronger correlation existed beween ploidy and clinical stage and tumor size(P<0.01).Conclusion Patients with pancreatic cancer had more aneuploid,clinical manifestations were poorer chance for radical surgery and poorer probability of survival.

  【Key words】 Pancreatic neoplasms  DNA/analyse  Ploidies

  应用全自动图像分析仪对胰腺癌细胞DNA含量进行定量分析,旨在探讨DNA含量、倍型与临床病理指标的关系,为胰腺癌的临床研究提供有价值的参考资料。

材料与方法

  一、一般资料 我院收治的胰腺癌住院手术病68例,男39例,女29例,中位年龄55.9岁(41~73岁)。所有患者术前均未作过放疗及系统化疗,全部病例均经病理切片证实。术中记录肿瘤大小、部位、临床分期。

  二、标本处理及DNA含量测定 取胰腺癌组织,福尔马林固定,石腊包埋,5 μm切片2张,1张行HE染色,确定Kloppel病理分级[1];另1张行Feulgen染色,应用IBAS全自动图像分析仪(德国Kontron公司产品)测定其癌细胞DNA倍型及μ值(即DNA相对含量,为所测癌细胞积分光密度与同片淋巴结细胞积分光密度之比)。将Feulgen染色片置于×40倍物镜下,每个标本随机选择3~4个视野,测100个以上癌细胞,同时测50个以上同片癌周小淋巴细胞积分光密度作正常2倍体对照。经计算机处理,打印出μ值及癌细胞DNA区段的百分率,按文献[2]确定DNA倍型。

结 果

  一、DNA倍型与手术切除可能性的关系 全组68例,行根治性手术18例占26.5%,行姑息性手术或仅剖腹探查取活检术50例占73.5%。本组胰腺癌细胞2倍体/近2倍体率(2C)及异倍体率(AN)分别为26.5%及73.5%。手术切除组2倍体率、异倍体率分别为66.67%(12/18)及33.33%(6/18),与肿瘤未切除组相比均有显著差异,后者分别为12%(6/50)及88%(44/50)。手术切除组癌细胞DNA相对含量μ值为1.68±0.39,低于肿瘤未切除组2.98±0.51(P<0.05)。

  二、病理分级、临床分期及肿块大小与DNA倍型的关系见表1。经相关分析表明DNA倍型与病理分级无关(P>0.05),而与临床分期及肿瘤大小相关(P<0.01),临床分期越早,肿块越小,2倍体率越高,异倍体率越低。

表1 病理分级、临床分期及肿瘤大小与DNA倍型的关系

类  型 例数(n) 2C/近2C AN
KloppelⅠ 21 6 15
KloppelⅡ 30 9 21
KloppelⅢ 17 3 14
临床Ⅰ期 11 9 2
临床Ⅱ期 17 6 11
临床Ⅲ期 21 2 19
临床Ⅳ期 19 1 18
肿块≤3cm 17 14 3
肿块>3cm 51 4 47

  三、患者预后与DNA倍型的关系 2C患者术后生存时间为15.1±8.5个月(中位数13.2个月),明显长于AN患者的10.8±5.2个月(中位生存时间7.8个月)。

讨 论

  细胞分裂的实质是DNA的复制。肿瘤细胞由于调节与生长控制系统障碍而获得无限增殖的能力时,就需要大量的核酸以满足其迅速增长的物质需要。因此,DNA含量的变化可作为直接反映肿瘤增殖能力的重要生物学指标。在正常同类细胞中,细胞核DNA含量是恒定的,基本处于分裂间期,其细胞核DNA含量为较恒定的二倍体(Diploid),仅有一个2C峰。即这些细胞功能增强时,DNA合成增加,可出现多倍体细胞,但主要仍为2C细胞。恶性肿瘤细胞由于核酸代谢异常或染色体变异,常表现为DNA含量异常增加,DNA分布曲线右移,多倍体细胞明显增多,并出现大量异倍体(Aneuploid)。因此DNA倍体值可作为判定肿瘤良恶性程度的良好指标,非整倍体细胞越多,肿瘤细胞分化程度越差,恶性程度越高。DNA异倍体的出现是恶性肿瘤的一个重要生物学标志。以前的研究表明,胰腺癌异倍体出现率可达60%~90%[2,3],本组为73.5%,与文献相当。

  Weger等[2]认为手术切除性与其DNA含量、倍型高度相关,其2C、4C、AN患者手术切除率分别为87.5%、48.6%及25.9%,说明2倍体/近2倍体肿瘤有较高的手术切除率。本实验也证实了以上观点。表明AN细胞恶性程度可能更高,增殖状态更活跃,患者预后不良。

  参考文献

  [1]Kloppel G.Actual aspects of cancer of the pancreas.Dtsch Med Wochenschr,1979,104(7)∶1801

  [2]Weger AR,Glaser KS,Schwab G,et al.Quantitative nuclear DNA content in fine needle aspirates of pancreatic cancer.Gut,1991,32(3)∶325

  [3]Herrera MF,Heerden JA,Katzmann JA,et al.Evaluation of DNA nuclear pattern as a prognostic determinant in resected pancreatic ductal adenocarcinoma.Ann Surg,1992,215(2)∶120

收稿日期:1999-03-05 修回日期:1999-06-01


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