TGF-β1和TβRⅡ在胰腺癌组织中的表达及临床意义

癌症 1999年第2期第18卷 临床研究

作者：张俐△　袁世珍　徐克强

单位：中山医科大学孙逸仙纪念医院(广州，510120)

关键词：胰腺癌；转化生长因子β1(TGF－β1)；转化生长因子βⅡ受体(TβRⅡ)；免疫组化

　　【摘要】目的：对人胰腺癌中转化生长因子β1(TGF－β1)及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)的表达进行研究，探讨其与胰腺癌进展、转移的关系。方法：应用SABC免疫组化方法检测TGF－β1、TβRⅡ在10例正常胰腺，13例慢性胰腺炎和36例胰腺癌中的表达。结果：1.TGF－β1、TβRⅡ阳性率在正常胰腺均为10.0％，慢性胰腺炎中分别为7.7％、15.4％，胰腺癌中分别为44.4％、47.2％，胰腺癌中的阳性率明显高于前两组(P＜0.05))；2.TGF－β1、TβRⅡ的表达与胰腺癌患者的年龄、性别、肿瘤的大小、位置、组织学分级无关(P＞0.05)，与临床分期相关(P＜0.001)；3.TGF－β1、TβRⅡ在胰腺癌中共同阳性率为36.1％，其共同表达与胰腺癌的组织学分级和临床分期有关(P＜0.001)。结论：单独检测TGF－β1、TβRⅡ的表达对判断胰腺癌的进展、转移趋势有参考价值；二者共同表达对判断胰腺癌的恶性程度及进展、转移趋势有参考价值。

　　中图号：R735.9　　文献标识码：A　　文章编号：1000－467X(1999)02－0208－03

Expression and significance of TGF-β1 and TβRⅡ

　　in human pancreatic ductal adenocarcinoma

ZHANG Li,　YUAN Shi-zhen　 xU Ke-qiangDivision of Gastroenterology,Sun Yat-sen Memorial Hospital,

　　sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou,510120,China

　　【Abstrct】Purpose:To explore the relationship of both expression of TGF-β1 and TβRⅡ and progression,metastases of pancreatic cancer.Method:Using strepto-advidinbiotin complex(SABC)method,TGF-β1 and TβRⅡ expression in 10 huma with normal pancreas,13 with chronic pancreatitis and 36 with pancreatic ductal adenocarcinoma was examined immunohistochemically.Results:1)TGF-β1 positive rate was 10.0％ ,7.7％ and 44.4％ ,respectively and TβRⅡ positive rate was 10.0％ ,15.4％ and 47.2％,respectively in the normal pancreas,chronic pancreatitis and pancreatic cancer.The two protein positive rate in pancreatic cancer was increased significantly compared with normal pancreas and chronic pancreatitis(P＜0.05).2)TGF-β1 and TβRⅡ expression was not related to the age,sex of the patients,and site,size and histopathological grade of tumors(P＞0.05)， but related to clinical stage of tumor(P＜0.001).3)Comexprexxion rate of TGF-β1 and TβRⅡ was 36.1％ (13/36).The coexpression in pancreatic cancer was correlated to the histopathological grade and clinical stage of tumors(P＜0.001).Conclusion:It will be usful to detect the expression of TGF-β1 and TβRⅡ in the human pancreatic cancer, for assess the progression and metases of pancreatic cancer.Examining coexpreaaion of TGF-β1 and TβRⅡ in pancreatic cancer will be helpful to evaluate its malignant degree,progresion and metastases.

　　Key Words:　Pancreatic cancer;Transforming growth factor-β1(TGF-β1);Type Ⅱ of transforming growth factor-β receptor(TβRⅡ )； immunohischemistry

　　胰腺癌是一种恶性程度高、预后极差的肿瘤之一。因其早期诊断困难，进展快，治疗效果差。在西方国家，胰腺癌死亡率居癌症死亡率的第4位或第5位。5年生存率仅1％～2％，确诊病人的平均中位生存期仅3～4个月^[1]。

　　目前，对胰腺癌的生物学行为和其进展、侵袭的原因仍了解甚少。有研究表明表皮生长因子受体(EGFR)和它的配体表皮生长因子(EGF)和TGF－α可促进胰腺癌的生长，其共同表达与胰腺癌的进展有关^[2]。提示生长因子及受体表达的异常可能与胰腺癌的发生发展有关。TGF-β1和TβRⅡ是生长因子另一家族的成员，研究表明，在体外TGF-β1可抑制鼠和人的胰腺癌细胞株生长^[3]。TGF-β1对体内胰腺癌细胞作用怎样，国内研究甚少，国内未见报道。本研究通过检测此两种蛋白在正常胰腺、慢性胰腺炎(CP)、胰腺癌(PC)中的表达，探讨其与胰腺癌进展、转移的关系。

　　1　材料与方法

　　1.1　标本来源

　　收集1990年1月～1997年12月孙逸仙纪念医院、广州市一医院、衡阳医学院附属医院病理科存档胰腺组织蜡块，正常胰腺10例(男6例，女4例外，平均年龄48.6±8.5岁)，慢性胰腺炎13例(男9例，女4例，平均年龄52.4±10.3岁)，其中1例有导管扩张伴乳头状不典型增生，胰腺癌36例(男24，女12例，平均年龄54.1±8.9岁)均为导管腺癌(组织学分级：1级10例、2级16例、3级10例，临床分期：Ⅰ＋Ⅱ期16例、Ⅲ＋Ⅳ期20例)，3组在性别、年龄分布上无显著差异(P＞0.05)

　　1.2　方法

　　采用SABC法进行免疫组化染色。试剂：一抗：兔抗人TGF－β1抗原多抗，兔抗人TβRⅡ多抗，美国Santa公司产品；ABC.Kit：博士德公司产品。用TGF-β1阳性的乳腺癌、TβRⅡ阳性的胃癌分别作TGF-β1、TβRⅡ的阳性对照，以PBS替代一抗作阴性对照。

　　1.3　免疫组化结果判定标准

　　阳性标准参照Friess^[4]和Hirayama^[5]标准稍加修改：染色强度在×100倍镜下清楚可见棕黄色染色，阳性细胞率＞10％者定为阳性，否则为阴性。

　　1.4　统计学处理

　　率的比较用χ2检验或确切概率检验，相关关系用等级相关分析。

　　2　结果

　　2.1　TGF－β1、TβRⅡ的表达

　　2.1.1　正常胰腺、CP、PC中的表达(表1)

表1　正常胰腺、CP、PC中TGF－β1、TβRⅡ的表达

*CP组与正常组比较差异无显著性(P＞0.05)；＃PC组与其它两组比较差异均有显著性(P＜0.05)

　　TGF-β1、TβRⅡ在PC中阳性细胞胞浆或胞膜呈棕黄(褐)色，阳性颗粒粗细不等(图1，图2)；阴性细胞胞膜、胞浆不着色，胞核呈紫蓝色。正常胰腺组织中可见少量散在腺泡细胞胞浆着色，1例CP中扩张的导管上皮细胞及增生小导管上皮细胞阳性(图3)。1例胰腺癌癌旁变性的腺泡细胞和导管细胞呈阳性着色。

图1　低分化腺癌细胞浆TGF-β1表达SABC染色×400图2　高分化腺癌细胞膜TβRⅡ表达SABC染色×200图3　慢性胰腺炎部分扩张伴不典型增生上皮细胞

　　tGFβ1TβRⅡ表达SABC染色×200

　　2.1.2　TGF－β1、TβRⅡ表达与胰腺癌临床、病理特征的关系

　　TGF-β1、TβRⅡ的表达与胰腺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、部位及组织学分级无明显关系(P＞0.05)与临床分期有关(P＜0.001)。详见表2。

表2　TGF－β1、TβRⅡ表达与胰腺癌临床、病理特征的关系

　　2.2　TGF－β1、TβRⅡ协同表达的关系

　　TGF－β1、TβRⅡ共同表达率为36.1％(13/36)，二者在PC中的表达呈高度正相关(r=0.6096,P＜0.001)；13例共同阳性者，11例组织学分级为2，3级，临床分期为Ⅲ＋Ⅳ期，其共同表达与PC的组织学分级、临床分期有关(P＜0.001)。见表3。

表3　TGF－β1与TβRⅡ在PC中表达的关系

　　3　讨论　　TGF-β1分子量为25KD，是由两个分子量为12KD的单体分子通过链间二硫键连接成的二聚体。它对细胞的增殖、分化起双重调节作用，还在血管生成、损伤修复、免疫抑制、细胞外基质形成、纤维化和肿瘤的发生中起重要作用^[6]。

　　研究表明，在胃癌、乳腺癌、甲状腺癌中有TGF-β1的过表达，其过度表达提示与肿瘤的进展、预后有关^[5，7，8]。我们的研究发现通过与正常胰腺、慢性胰腺炎组比较，人胰腺癌组织中TGF-β1呈过表达，这与国外作者报道结果一致，其过度表达可能是TGF-β1合成增加或释放机制改变有关^[4]。本研究表明TGF-β1的过度表达与胰腺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、部位及组织学分级无关，与其临床分期有关。TGF-β1在Ⅲ＋Ⅳ期的胰腺癌中的阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期者，提示TGF-β1的过度表达与胰腺癌的进展、转移有关。TGF-β1在胰腺癌中的作用机制仍不太清楚，可能与：(1)由于TGF-β1在体内刺激血管生成和明显的免疫抑制功能，增加了肿瘤的血液供应，抑制对肿瘤识别的细胞溶解的免疫机制^[9]；(2)增加粘附分子和细胞外基质的表达，从而增强肿瘤细胞转移的潜能^[10]；(3)胰腺癌细胞在体内也许逃避TGF－β1介导的生长抑制作用，而发挥TGF-β1介导的促进胰腺癌细胞生长的旁分泌作用^[11]有关。研究还发现1例慢性胰腺炎中扩张伴不典型增生的导管上皮细胞有TGF-β1、TβRⅡ共同表达，其表达是否与细胞的增殖和癌变有关，因例数太少，本例又无随访资料，此问题有待进一步研究。

　　胰腺癌细胞在体内对TGF-β1有反应，必须表达TβR。TβRⅡ分子量为75KD，由细胞外受体结合区、跨膜区及具有丝/苏氨酸激酶活性的复合物胞浆区组成^[12]。TβRⅡ在TGF-β1介导的信号传导中起关键作用。我们的研究发现通过与正常胰腺、慢性胰腺炎组比较，TβRⅡ在胰腺癌中呈过度表达，其过度表达与胰腺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、部位及组织学分级无关，而与临床分期有关。这与Lu的报道一致^[11]。TGF-β1与TβRⅡ共同表达，允许TGF-β1与TβRⅡ结合，再通过TβRⅠ传递信号，激活有核原癌基因，促进细胞增殖分化^[13]。我们研究发现TGF-β1与TβRⅡ在胰腺癌中共同阳性率为36.1％，二者在胰腺癌中的表达呈正相关，提示二者对胰腺癌的发生可能有协同作用。TGF-β1与TβRⅡ共同表达与胰腺癌的组织学分级及临床分期明显相关，其共同表达提示胰腺癌恶性程度高、疾病进展快和转移潜能大。

　　综上所述，本文结果提示检测TGF-β1与TβRⅡ在胰腺癌中表达，对判断胰腺癌的恶性程度、病程进展、转移趋势有一定参考价值。

　　Δ国内访问学者，现在湖南省衡阳医学院第二附属医院工作(421001)

　　基金项目：美国中华医学基金会(CMB)资助课题

　　参考文献

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收稿日期：1998－07－23；修回日期：1998－10－07