膀胱癌细胞株和组织端粒酶活性研究

中华泌尿外科杂志 1998年第12期第19卷 论著摘要

作者：彭钧铮　张元芳　丁强　赵琳琳　潘崇贤

单位：200040 上海医科大学泌尿外科研究所(彭钧铮、张元芳、丁强)；中科院上海分院细胞所(赵琳琳)；美国芝加哥洛约那大学医学和癌症研究中心(潘崇贤)

　　为探讨端粒酶活性表达与膀胱癌的关系，采用端粒重复片段扩增方法对膀胱癌细胞株，正常膀胱组织，膀胱炎性组织，膀胱癌组织，癌旁组织的端粒酶活性表达进行研究。报告如下。

　　材料与方法　膀胱癌细胞株(T24)，Hela细胞株购于中科院上海分院细胞所。26例经病理证实的膀胱癌肿块标本及邻近组织标本，5例正常膀胱组织，4例膀胱炎性组织标本-80℃保存。溶解缓冲液，新鲜配置的0.1mmol/L苯甲基磺酰氟，10×TRAP反应缓冲液，引物TS，CX。端粒酶活性表达检测法端粒重复片段扩增方法(TRAP法)参照Kim等^［1］报道方法。PCR扩增通过检测端粒酶合成的6个碱基对端粒DNA片段的特征性产物反映端粒酶的活性表达。

　　结　果　10⁶Hela细胞作为阳性对照表达端粒酶活性，溶解缓冲液作为阴性对照无端粒酶活性表达，经RNase酶处理的10⁵膀胱癌细胞无端粒酶活性表达，10⁵、10⁴、10³、10²、10个膀胱癌细胞均有端粒酶活性表达。5例正常膀胱组织，4例炎性组织均无端粒酶表达，18例膀胱癌表达端粒酶活性(69%)，3例邻近组织表达端粒酶活性(11%)，

　　讨　论　端粒酶具有稳定染色体末端特殊结构端粒的作用，防止细胞分裂衰亡，在细胞永生化和肿瘤形成中起重要作用，与肿瘤无限制性浸润生长密切相关。本研究表明端粒酶活性可在少至10个的膀胱癌细胞株中检出，具有高效灵敏快速的特点，但该方法为定性方法无法作定量分析。端粒酶是DNA和蛋白质的复合体，很容易降解，宜在取材后速-80℃冷藏，活检时尽量取新鲜存活组织多块，避免用肿瘤表面坏死组织。本组正常膀胱组织膀胱炎性组织均无端粒酶活性表达，69%膀胱癌表达端粒酶活性，膀胱癌邻近组织11%有端粒酶活性表达。端粒酶活化是膀胱癌多基因形成过程的关键步骤，有助于区分膀胱良恶性病变，肿瘤邻近组织端粒酶活性表达在膀胱癌预后中的价值有待长期随访研究。

　　参考文献

　　1　Kim NM,Riatyszek MA,Prowse KK,et al.Specific association of human telomerase activity with immortal cells and cancer.Science,1994,266∶2011.

(收稿：1998-04-28　修回：1998-09-01)