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鼻咽癌中端粒酶活性的相对定量检测

鼻咽癌中端粒酶活性的相对定量检测

中华医学检验杂志 1999年第3期第22卷 简报

作者:文忠 肖键云 唐发清 田勇泉 赵素萍

单位:文忠 肖健云 田勇泉 赵素萍(410008 长沙,湖南医科大学湘雅医院耳鼻咽喉研究室),唐发清(中心实验室)

  为了探讨端粒酶在鼻咽癌中的表达规律及相对含量,我们用端粒酶聚合酶链反应(PCR)-酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒,测定了鼻咽癌组织的端粒酶活性。从HNE1细胞株提取物中显示,酶活性与细胞数呈线性关系,灵敏度可达102个HNE1细胞,并从热灭活测定中显示较高的特异性。以此法对18例鼻咽癌组织(Ⅰ期5例,Ⅱ期0例,Ⅲ期9例,Ⅳ期4例),4例鼻咽癌癌旁组织,4例慢性鼻咽炎组织以及鼻咽癌组织HNE1、血管平滑肌细胞株和骨髓细胞中的端粒酶活性进行了相对定量的测定。吸光度A450>0.20为阳性,所得结果如表1所示。

表1 端粒酶活性的检测结果(±s)

标本来源 例数 端粒酶活性

  (A450)

鼻咽癌组织

18

1.03±0.88
鼻咽癌旁组织 4 1.00±0.59
慢性鼻咽炎组织 4 0.16±0.06
HNE1细胞株细胞 22 0.73±0.26
白血病骨髓细胞 5 0.70±0.24
正常骨髓细胞 2 0.07
血管平滑肌细胞 6 0.19±0.14

  由表1可知,鼻咽癌及其癌旁组织端粒酶阳性,而慢性鼻咽炎组织为阴性。在测定的细胞中,鼻咽癌HNE1细胞株和白血病骨髓细胞的端粒酶阳性;血管平滑肌细胞株和正常骨髓细胞的端粒酶为阴性。该定量法具有方法简便,结果可靠,灵敏度高,易于比较不同程度的端粒酶活性状态的特点,尤其是对定性法显示出的弱阳性或PAGE电泳图显示不清晰的情况下,该定量法更能准确表达端粒酶的活性状态。与同时进行的PAGE电泳方法比较,结果也具有良好的一致性。

  本课题受湖南省教委基金资助[编号:98SSY1008(2)1]

(收稿:1998-12-11)


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