乳腺癌DNA倍性与雌激素受体及淋巴结转移的关系

临床与实验病理学杂志 1999年第2期第15卷 论著摘要

作者：贺兰湘　周济兰　杨峰

单位：贺兰湘　周济兰　杨峰（湖北省肿瘤研究所流式细胞室，武汉　430079）

关键词：乳腺肿瘤；DNA；倍性；受体；雌激素；淋巴转移；流式细胞术

　　中国图书分类号　R737.9；R392.31

　　文献标识码　A　　文章编号　1001-7399(1999)02-0183-01

　　我们拟采用新鲜标本对乳腺癌的几个预后因素作前瞻性研究，以克服用石蜡包埋组织作回顾性研究时出现的图形分辨差、准确性相对较低的问题。本文作为一个阶段性总结，对100例乳腺癌进行DNA倍性分析，同时比较不同DNA倍性的乳腺癌细胞的区域淋巴结转移和雌激素受体表达情况，以期更准确地判断患者的预后，指导临床治疗。

　　1　材料和方法

　　1.1　临床病理资料　1996年12月～1998年7月湖北省肿瘤医院乳腺科的新鲜手术标本100例，均经病理确诊。平均年龄43.3岁(28～68岁)。其中浸润性导管癌87例，浸润性小叶癌9例，浸润性导管癌合并小叶癌4例。

　　1.2　标本制备　取1块约0.5 cm³的病灶组织(其余病灶组织送病检及雌激素受体测定)，剪碎，100目铜网过滤，75%乙醇固定，4℃过夜，用DAPI(二氨基-2-苯基吲哚)染色DNA，300目尼龙网过滤后即可上机。

　　1.3　FCM测定　PASIIIi流式细胞仪为德国PARTEC公司产品，以汞灯为激发光源，荧光信号通过435 nm波长的滤镜，DAPI产生的蓝色荧光信号被收集起来，经计算机处理(FLOW系统)，即可得到所需的DNA直方图，用于DNA峰值计算，每份标本收集2万个细胞。

　　1.4　雌激素受体分析(SABC法)　武汉博士德公司提供的即用型产品，单克隆抗体，用微波修复抗原，DAB显色。

　　1.5　资料分析　以同一乳房的正常乳腺组织作为参照计算DNA指数(DI)。DI为待测标本与参照标本的G₁期峰值之比。DI在0.9～1.10之间为二倍体，在此范围之外的为异倍体；异倍体可分为如下几种：①高倍体(DI＞1.10)，②低倍体(DI＜0.9)，③多倍体：多个G₁期峰，提示有多种不同DNA含量的细胞存在。两个率的比较用χ²检验。

　　2　结果

　　2.1　DNA倍性分析　100例乳腺癌中，二倍体占19%，异倍体占81%(高倍体2%，低倍体9%，多倍体70%)，导管癌以多倍体和二倍体为主，分别占73.56%和20.69%，小叶癌以多倍体和低倍体为主，各占44.44%，见表1。

表1　乳腺癌DNA倍性分析

　　中国图书分类号　R737.9；R392.31

　　文献标识码　A　　文章编号　1001-7399(1999)02-0183-01

　　我们拟采用新鲜标本对乳腺癌的几个预后因素作前瞻性研究，以克服用石蜡包埋组织作回顾性研究时出现的图形分辨差、准确性相对较低的问题。本文作为一个阶段性总结，对100例乳腺癌进行DNA倍性分析，同时比较不同DNA倍性的乳腺癌细胞的区域淋巴结转移和雌激素受体表达情况，以期更准确地判断患者的预后，指导临床治疗。

　　1　材料和方法

　　1.1　临床病理资料　1996年12月～1998年7月湖北省肿瘤医院乳腺科的新鲜手术标本100例，均经病理确诊。平均年龄43.3岁(28～68岁)。其中浸润性导管癌87例，浸润性小叶癌9例，浸润性导管癌合并小叶癌4例。

　　1.2　标本制备　取1块约0.5 cm³的病灶组织(其余病灶组织送病检及雌激素受体测定)，剪碎，100目铜网过滤，75%乙醇固定，4℃过夜，用DAPI(二氨基-2-苯基吲哚)染色DNA，300目尼龙网过滤后即可上机。

　　1.3　FCM测定　PASIIIi流式细胞仪为德国PARTEC公司产品，以汞灯为激发光源，荧光信号通过435 nm波长的滤镜，DAPI产生的蓝色荧光信号被收集起来，经计算机处理(FLOW系统)，即可得到所需的DNA直方图，用于DNA峰值计算，每份标本收集2万个细胞。

　　1.4　雌激素受体分析(SABC法)　武汉博士德公司提供的即用型产品，单克隆抗体，用微波修复抗原，DAB显色。

　　1.5　资料分析　以同一乳房的正常乳腺组织作为参照计算DNA指数(DI)。DI为待测标本与参照标本的G₁期峰值之比。DI在0.9～1.10之间为二倍体，在此范围之外的为异倍体；异倍体可分为如下几种：①高倍体(DI＞1.10)，②低倍体(DI＜0.9)，③多倍体：多个G₁期峰，提示有多种不同DNA含量的细胞存在。两个率的比较用χ²检验。

　　2　结果

　　2.1　DNA倍性分析　100例乳腺癌中，二倍体占19%，异倍体占81%(高倍体2%，低倍体9%，多倍体70%)，导管癌以多倍体和二倍体为主，分别占73.56%和20.69%，小叶癌以多倍体和低倍体为主，各占44.44%，见表1。

表1　乳腺癌DNA倍性分析

　　2.2　多倍体乳腺癌DNA直方图分析　70%的乳腺癌为多倍体，多倍体的峰型各异，具有3个G₁峰者14例(20%)，2个G₁峰者56例(80%)；含高倍体峰者61例(87.14%)，含二倍体峰者48例(68.57%)；二倍体G₁峰所占比例低于异常G₁峰者15例(21.43%)。

　　2.3　淋巴结转移　按国际临床TNM分期，并经病检证实。二倍体的区域淋巴结阴性率(47.37%)高于异倍体(35.80%)，N₂期以上者异倍体占95%，二倍体占5%，具有显著的统计学差异(P＜0.01)。

表2　乳腺癌DNA倍性与淋巴结转移的关系

　　2.4　雌激素受体分析　100例乳腺癌标本中有96例作了雌激素受体分析。雌激素受体阴性和阳性组的异倍体率分别为88.89%和80.46%，但无统计学差异(P＞0.05)。

表3　乳腺癌DNA倍性与雌激素受体表达的关系

　　3　讨论　　乳腺癌的DNA倍性有何特征，DNA倍性与雌激素受体的表达以及区域淋巴结的转移有无联系，同一患者这3项预后指标是否一致目前少有报道。从本文结果看，乳腺癌的异倍体率高达81%，而且以多倍体为主，小叶癌和导管癌的倍体类型各异，多倍体的峰型也各不相同，含2种G₁峰的占80%，含3个G₁峰的占20%，这一现象可能是乳腺癌的异质性在流式细胞仪上的表现，也可能是不同患者疗效不同的原因之一。

　　二倍体肿瘤未出现区域淋巴结转移者多于异倍体肿瘤，而出现多个淋巴结转移者中异倍体肿瘤明显多于二倍体肿瘤。38例乳腺癌未发生区域淋巴结转移，其中29例是异倍体，占76.32%，这是否是淋巴结阴性而预后仍然不好的原因还有待进一步的探讨。

　　100例乳癌中兼具3种“好”的预后指标者仅7例(淋巴结阴性、二倍体、雌激素受体阳性)，兼具3种“坏”的预后指标者仅6例(淋巴结阳性、异倍体、雌激素受体阴性)。这些患者的预后究竟如何，还有待我们继续随访。

收稿日期：1998-09-02

修回日期：1998-11-18