⁹⁹Tc^m标记抗卵巢癌单抗在荷瘤裸鼠体内放射免疫显像的研究

中华核医学杂志 1999年第4期第19卷 论著摘要

作者：丁惠　杨辉　赵荣庆　钱和年　冯捷

单位：丁惠　郑州,河南省肿瘤医院妇瘤科　450003；杨辉　赵荣庆　核医学科；钱和年　冯捷　北京医科大学人民医院妇科肿瘤研究中心

　　应用⁹⁹Tc^m标记抗卵巢上皮癌单克隆抗体(McAb)COC183B₂，对荷人卵巢上皮癌裸鼠进行体内分布及放射免疫显像(RII)实验研究,为临床应用提供依据。

　　一、材料与方法

　　1. McAb。COC183B₂由北京医科大学人民医院妇科肿瘤中心提供。

　　2. 荷人卵巢癌裸鼠模型。BALB/c 4～6周龄雌性裸鼠由中国医学科学院动物中心提供。分别于双侧前背部、后臀部皮下接种人卵巢上皮癌细胞系SKOV₃,细胞数为(5～6)×10⁶/点,待瘤块长至0.5～1 cm即用于实验。

　　3. 抗体标记。采用预亚锡法^［1］标记。用纸层析法测定标记率,用ELISA间接法和免疫组化PAP法进行标记物免疫活性测定。阴性对照所用抗体选用正常小鼠免疫球蛋白(NMIgG)。

　　4. RII。荷瘤裸鼠随机分为2组,分别经腹腔注入⁹⁹Tc^m-COC183B₂和⁹⁹Tc^m-NMIgG。剂量为每只0.037 Bq(0.25 mg),给药后24 h用Sigma-438HR型γ相机进行显像。显像后处死裸鼠,分别取瘤、血、肌肉、肝、脾、小肠组织,称重,并用井

　　型探测仪测放射性计数,计算肿瘤组织与非肿瘤组织的T/NT比值。

　　5. 统计学处理。采用非参数检验(Kruskal-Wallis检验)。

　　二、结果

　　1. 抗体标记率及其活性。⁹⁹Tc^m-COC183B₂和⁹⁹Tc^m-NMIgG标记率分别为97.2%和98.9%。放化纯度在95%以上。标记后测定免疫活性,ELISA间接法测得标记物与卵巢上皮癌SKOV₃细胞系呈阳性反应,与标记前抗体稀释度相同,表明标记后抗体活性不受影响。免疫组化PAP法显示标记物与卵巢上皮癌石蜡切片反应,癌细胞着色,与标记前抗体的PAP显色相同。

　　2. RII与T/NT的比值。注射⁹⁹Tc^m-COC183B₂后24 h,实验组10块肿瘤组织中有7块显影,显像阳性率为70%。γ显像可见移植瘤部位有较高放射性聚集,肿瘤影像清晰,与裸鼠肿瘤位置符合(图1)。对照组4块肿瘤组织均无特异性放射性聚集。腹腔注射相同剂量的⁹⁹Tc^m-COC183B₂和⁹⁹Tc^m-NMIgG,24 h后,前者肿瘤组织与肝、脾、肠、肌肉、血的T/NT比值分别为0.99、1.02、1.69、5.99、1.19,后者分别为0.72、0.98、1.35、2.13、0.92。肝、肌肉、血的T/NT值差异有显著性,P均＜0.05。

　　三、讨论

　　在卵巢癌RII中,以往多用抗CEA单抗,不仅特异性差,而且对于不分泌或不含CEA的卵巢上皮癌很难发挥其导向作用。COC183B₂是用卵巢浆液性囊腺癌的组织提取液免疫动物制备而得,对卵巢癌有特异性,注药后24 h在卵巢癌组织中高度浓聚,T/NT、T/B比值明显高于对照组。肿瘤影像与实体肿瘤的大小、部位、形态完全一致。表明此单抗在裸鼠体内能较好地与肿瘤抗原特异性结合,对卵巢癌具有很好的定向选择性。

　　Haisma等^［2］通过实验证明腹腔注射较静脉注射优越。卵巢癌位于盆腔,转移方式以直接蔓延为主,腹腔内注射可使瘤灶更多、更直接地摄取放射性物质，提高显像效果。

　　参考文献

　　1　Alddin MM, Khawli LA, Epstein Al. An improved method of direct labeling monoclonal antibodies with ⁹⁹　Tc^m. Nucl Med Biol, 1992, 19:445-448.

　　2　Haisma HJ, Moseley KR, Battaile A, et al. Distribution and pharmaco-kinetics of radiolabeled monoclonal antibody OC125 after intravenous and intraperitoneal administration in gynecologic tumors. Am J Obstet Gynecol, 1988, 159:843-848.

（收稿：1998-11-26　　修回：1999-01-19）