Nm23-H₁基因表达与食管癌淋巴结转移相关性的研究

中国急救医学 2000年第1期第20卷 论著

作者：张临友　魏关春　刘大仲　谭佩林

单位：张临友（哈尔滨医科大学第二临床医学院胸外科，150086）；刘大仲（哈尔滨医科大学第二临床医学院胸外科，150086）；谭佩林（哈尔滨医科大学第二临床医学院胸外科，150086）；魏关春（黑龙江省清河林业局职工医院）

关键词：nm23-H1；食管癌；免疫组化S-P法

　　摘　要：目的　研究食管癌组织nm23-H₁基因表达及其与淋巴结转移的关系。方法　应用免疫组化S-P法检测54例食管癌标本中nm23-H₁基因的表达。结果　26例无淋巴结转移的食管癌中，有14例阳性表达，而在28例有淋巴结转移的食管癌中，13例阳性表达，两者无显著性差异。26例无淋巴结转移的食管癌中，nm23-H₁基因的平均阳性表达率为39.6%，在28例有淋巴结转移的食管癌中，平均阳性表达率为17.2%，两者差异显著。结论　nm23-H₁基因表达与否与食管癌的转移无关，但其表达水平的降低与食管癌的转移有关。

　　中图分类号：R 735.1；R 73-37　　文献标识码：A

　　文章编号：1002-1949(2000)01-0024-02

The relationship between nm23-H₁ gene expression and lymph node metastasis of the esophageal squamous cell carcinoma

ZHANG Lin-you（The second Affiliated Hospital,Harbin Medical University, Harbin Heilongjiang150086, China）

　　wEI Guan-chun（The Second Affiliated Hospital,Harbin Medical university, Harbin Heilongjiang 150086, China）

　　lIU Da-zhong,（The Second affiliated Hospital,Harbin Medical University, Harbin Heilongjiang 150086, China）

　　Abstract：Objective　To understand the relationship between the expression of nm23-H₁ gene and lymph node metastasis in the tissue of esophageal squamous cell carcinoma(ESCC).Method The expression of nm23-H₁ protein was examined in 26 ESCC without lymph node metastasis and 28 with lymph node metastasis using immunohistochimical S-P method.Results Fourteen of 26 ESCC without lymph node metastasis and 14 of 23 ESCC with lymph node metastasis were positive for nm23-H₁ staining while the nm23-H₁ protein average positive rates were 39.6% and in ESCC without lymph node metastasis and 17.2% in ESCC with lymph node metastasis respectively.Conclusion The expression was not correlated with lymph node metastasis,but reduced expression of nm23-H₁ gene was associated with lymph node metastasis.

　　Key words：nm23-H₁ gene;　Esophageal squamous cell carcinoma;　Immunohistochimical s-P method▲

　　食管癌是常见的恶性肿瘤之一，淋巴结转移是食管癌常见的转移途径，也是最常见的导致复发和死亡的原因。近年的研究表明，nm23-H₁基因是一种肿瘤转移抑制基因，与多种肿瘤的转移关系密切，也与患者的预后相关。本文应用免疫组化S-P技术对54例食管癌组织的nm23-H₁基因的表达情况进行了检测，以探讨其表达水平与食管癌淋巴结转移的关系。

　　1.材料与方法

　　1.1　一般资料　哈尔滨医科大学附属第二医院和附属第三医院1995年9月～1998年5月收治的54例食管癌患者，男32例，女22例。全部病例均经手术及病理确认为鳞癌。分为两组：无淋巴结转移26例和有淋巴结转移28例。

　　1.2　试剂　鼠抗人nm23-H₁-NM301(IgG1)单克隆抗体为美国O&S产品，S-P免疫组化染色试剂盒购自福州迈新公司。

　　1.3　方法　标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm切片。切片经系列脱腊，水化后备用。S-P免疫组化染色按试剂盒说明进行。采用PBS液代替一抗作阴性对照，阳性对照选用已知阳性片。

　　1.4　结果的观察及评定　以细胞浆内均匀一致的棕黄色颗粒为阳性(见附图)。每片观察5个高倍视野(10×40)，对视野中的癌细胞进行绝对计数并计算出阳性表达率。

附图　nm23-H₁基因在食管癌中的阳性表达情况图(10×40倍)

　　1.5　统计学处理　采用χ²检验。

　　2　结果

　　2.1　nm23-H₁基因的表达与食管癌转移相关性

　　nm23-H₁基因在26例无淋巴结转移的食管癌中，有14例为阳性表达，而在28例有淋巴结转移的食管癌中，有13例为阳性表达，两者统计学处理无显著性差异，说明nm23-H₁基因的表达与否与食管癌的转移无关(见附表)。

附表　nm23-H₁基因在食管癌中的表达情况

　　2.2　nm23-H₁基因的平均表达率与食管癌转移的关系　26例无淋巴结转移的食管癌中，nm23-H₁基因的平均表达率为39.6%，而在28例有淋巴结转移的食管癌中，nm23-H₁基因的平均表达率为17.2%，统计学分析两者差异显著，说明nm23-H₁基因表达率的降低与食管癌的转移有一定的关系(见附表)。3　讨论

　　nm23基因是1988年Steeg等^［1］从具有不同转移能力的小鼠黑色素K-1735细胞系中分离鉴定出来的一种肿瘤转移抑制基因。人类的nm23有两种同源亚型H₁和H₂，该基因可以通过其蛋白产物核苷二磷酸激酶(NDPK)分别与G蛋白、Ca²⁺介导的细胞信号传导系统作用，并可通过多种作用影响微管微丝等细胞骨架系统的活动。最近的研究发现，nm23-H₁基因的表达与S后期(late s-phase)有关，或引起S后期的功能。nm23基因的表达水平的下降则可能影响上述系统的正常活动，引起细胞分裂加速、粘着迁移能力的改变^［2］。大量的研究表明，在多种肿瘤中都存在着nm23-H₁基因的表达率的降低，并证明它与肿瘤的转移密切相关^［3］。冯大作、华长江等^［4，5］分别通过对nm23-H₁基因表达与大肠癌淋巴结转移关系的研究发现，大肠癌的淋巴结转移与nm23-H₁基因的表达水平呈负相关，nm23-H₁基因的表达水平的降低在大肠癌的淋巴结转移中起一定的作用，可通过其表达水平的检测对大肠癌的淋巴结转移进行预测。lizuka n等^［6］通过对日本的50例食管癌的nm23-H₁的表达水平的研究发现，尽管nm23-H₁基因的阳性表达与否与食管癌的转移无关，但是nm23-H₁基因表达率的降低与食管癌的转移有一定的关系，而且nm23-H₁基因的阳性表达与食管癌患者的预后密切相关，nm23-H₁基因表达阴性的病人的存活率明显低于nm23-H₁基因表达阳性的病人。他们还通过对食管癌细胞系的转染实验证实，nm23-H₁基因表达率的降低与患者对抗癌药物cisplatin产生抗性有关，可作为是否采用该类药物进行化疗的指标。

　　在肿瘤的演进过程中，存在着癌基因的激活和抑癌基因及转移抑制基因的失活或丢失。目前认为很多癌症的转移都涉及到抑癌基因和肿瘤转移抑制基因的失活或丢失^［7］。nm23-H₁基因的蛋白产物可以影响细胞内的信号转导系统对G蛋白细胞骨架的作用，并对S期的启动和终止产生不同的影响。本研究采用免疫组化法对26例无淋巴结转移的食管癌和28例有淋巴结转移的食管癌的nm23-H₁的表达情况进行检测，结果显示nm23-H₁基因表达率的降低与食管癌的转移有一定的关系，说明nm23-H₁基因的表达在食管癌的淋巴结转移中起一定的作用，可用于食管癌淋巴结转移的预测。

　　总之，nm23-H₁基因的表达与食管癌的转移及预后都有一定的关系，同时与化疗的用药有一定的联系。因此，对nm23-H₁基因的表达与否及表达率的高低的正确评估将有助于更好预测食管癌患者的转移和预后，并为食管癌的综合治疗提供依据。■

　　参考文献：

　　［1］Steeg PS,Cohn KH,Leone A,et al.Tumor metastasis and nm23:current comcepts［J］.Cancer Cells,1991,3:257.

　　［2］Caligo Mak,Copollini G,Fiore L,et al.Nm23 gene expression correlates with cell growth rate and S-phase［J］.Int J Cancer,1995,60:837.

　　［3］Tannapfel A,Kockerling F,Katalinie A,et al.Expression.of nm23-H₁ predicts lymph node involvement in colorectal carcinoma［J］.Dis Colon rectum,1995,38:651.

　　［4］冯大作，雷三林.nm23-H₁的表达与大肠癌的淋巴结转移相关性的研究［J］.临床肿瘤学杂志，1999，4(2)：1.

　　［5］华长江，殷广福，苏长青.nm23-H₁和H-ras基因在大肠癌中的表达及其与淋巴结转移的关系［J］.临床肿瘤学杂志，1997，2(4)：25.

　　［6］Lizuka N,Hirose K,Noma T,et al.The nm23-H₁ gene as a predictor of sensitivity to chemotherapeutic agents in oesophageal squamous cell carcinoma［J］.Br j Cancer 1999 Oct，81(3):469-75.

　　［7］张有会.现代肿瘤(基础部分)［M］.第一版.北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1991.342

收稿日期：1999-05-20